武漢思特進(jìn)(多圖)-熒光原位雜交

惰性多聚體可用來促進(jìn)250個(gè)堿基以上的探針的雜交率。對(duì)單鏈探針可增加3倍，熒光原位雜交，而對(duì)雙鏈探針、隨機(jī)剪切或隨機(jī)引物標(biāo)記的探針可增加高達(dá)100倍。而短探針不需用促進(jìn)劑，因其復(fù)雜度低和分子量小 ，短探針本身的雜交率就高 。*葡聚糖是一種廣泛用于較長雙鏈探針雜交的促進(jìn)劑。這是一種多聚胺，平均分子量為500 000。另一種常見的促進(jìn)劑是聚乙二醇（peg），peg分子量小（6000～8000）、粘度低、價(jià)格低廉，但它不能完成取代*葡聚糖。在某些條件下5%～10%*葡聚糖效果較好，若用5%～10%peg則可產(chǎn)生很高的本底。因此，使用促進(jìn)劑時(shí)有必要優(yōu)化條件。
原位雜交試驗(yàn)
收集斑馬魚的胚胎，在holfretor水中培養(yǎng)，到達(dá)所需要的發(fā)育時(shí)期時(shí)，用蛋白酶去除卵膜，用4%*固定，在4℃保存，二十四小時(shí)后用50%甲6醇2%*溶液洗，然后換成甲9醇，在-20c 保存，待用(兩天和兩天以上的胚胎需要用雙氧6水處理，去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培養(yǎng)，可阻斷色素的形成)
原位雜交是指將特定標(biāo)記的已知順序核酸為探針與細(xì)胞或組織切片中核酸進(jìn)行雜交，從而對(duì)特定核酸順序進(jìn)行精0準(zhǔn)確定量定位的過程。原位雜交可以在細(xì)胞標(biāo)本或組織標(biāo)本上進(jìn)行。
原位雜交（in situ hybridization）將標(biāo)記的核酸探針與細(xì)胞或組織中的核酸進(jìn)行雜交，稱為原位雜交。
使用dna或者rna探針來檢測與其互補(bǔ)的另一條鏈在*或其他真核細(xì)胞中的位置。
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